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Trizol을 이용한 RNA 추출 원리
RNA를 추출할 때 사용되어지는 각 시약의 역할과 원리에 대해서 알아봅니다. RNA 추출원리는 세포, 조직 및 액체시료에서도 동일하게 작용을 하며 각 단계가 어떻게 작용이 확인합니다. RNA 추출의 전체적인 요약 Trizol의 많은 성분 중에서 퀴니딘 이소티오시아네이트 (quinidine isothiocyanate)는 강력한 RNase 억제제이며 페놀은 세포 내 단백질과 지질을 분해합니다. 파쇄된 혼합물에 클로로포름 (Chloroform)을 첨가하면 수층과 유기층으로 분리되고, 이소프로필알코올 (isopropanol)로 침전시켜 수층에 존재하는 RNA를 분리합니다. 침전된 RNA는 TE 완충액이나 RNase가 없는 물에 용해하여 얻을 수 있으며 추출 과정에서 시약에 의해 RNA가 변성되는 것을 방지하여 ..