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[WB] 단백질 정량 실수 - BCA 정량 꿀팁 총정리 (Trouble shooting-1)
단백질 정량 실수로 망치는 시그널Western blot 시그널 안 나올 땐 단백질 정량부터 다시 생각해보시길 권장드립니다.정량후 단백질도 제대로 넣었는데 밴드가 잘 detection 되지 않는 경우가 있으시죠?저도 실험할 때 한 번쯤 해본 고민입니다. 알고 보면 가장 기초적인 ‘단백질 정량’에서 이미 문제가 시작됐을 수 있어요.Western blot에서 시그널이 안 보일 땐 가장 먼저 정량 정확도와 로딩량을 의심해봐야 합니다.정량의 중요성Western blot은 정량분석이 아니라 정성분석(qualitative) 중심이라, 정확한 단백질 양을 넣어주지 않으면 아무리 항체가 좋아도 시그널이 약하게 뜨거나 아예 안 뜰 수 있습니다.보통 세포추출 단백질의 경우 20–30 µg 정도를 로딩하면 안정적인 시그널이..