정보를 주는 앙과장

실험 프로토콜

cDNA (Complementary DNA)이란?  세포 내에 mRNA를 주형으로 하여 cDNA를 먼저 합성하고 합성된 cDNA를 다시 주형으로 하여  유전자의 발현 정도를 측정한다.  cDNA 합성 원리 Reverse transcription-PCR은 세포에서 추출된 Total RNA (rRNA, tRNA, mRNA 등)에서  mRNA에서만 존재하는 Poly A tail을 detect하는 Oligo dT를 primer로 사용하여  reverse transcriptase를 이용하여 cDNA를 합성한다.   cDNA 합성 목적 각 세포 (Cell)이나 조직 (Tissue)에서 발현되는 mRNA를 분리 정제하여 역전사효소를 사용하여   합성된 cDNA를 기반으로 세포내에 유전자의 발현 정도를 확인하고자 한다..

실험 프로토콜

클로노제닉 어세이란 콜로니 형성 분석으로도 알려진 클론 생성 분석은 개별 세포의 생존, 번식 및 콜로니 형성 능력을 평가하는 데 사용되는 널리 사용되는 시험관 내 세포 생존 분석입니다. 적용 분야 클론 생성 분석은 방사선, 화학요법, 표적 치료에 대한 암과 정상 세포의 민감도를 평가하고 치료 요법의 임상적 효과를 나타내는 데 사용됩니다. 약물 조합 및 조합 치료법은 상가적, 시너지 효과를 제공하여 보다 효과적인 치료 옵션을 제공할 수 있습니다. 클로노제닉 어세이 방법 두가지 방법이 있습니다. 1) 셀을 낮은 밀도로 seeding 하고 일정 기간 약물을 처리하는 방법, 2) 높은 밀도로 seeding 하여 약물을 처리한 후 harvest하여 낮은 밀도로 re-seeding 하는 방법 각각의 방법은 목적에 ..

생명과학 정보의 창

RNA를 추출할 때 사용되어지는 각 시약의 역할과 원리에 대해서 알아봅니다. RNA 추출원리는 세포, 조직 및 액체시료에서도 동일하게 작용을 하며 각 단계가 어떻게 작용이 확인합니다. RNA 추출의 전체적인 요약 Trizol의 많은 성분 중에서 퀴니딘 이소티오시아네이트 (quinidine isothiocyanate)는 강력한 RNase 억제제이며 페놀은 세포 내 단백질과 지질을 분해합니다. 파쇄된 혼합물에 클로로포름 (Chloroform)을 첨가하면 수층과 유기층으로 분리되고, 이소프로필알코올 (isopropanol)로 침전시켜 수층에 존재하는 RNA를 분리합니다. 침전된 RNA는 TE 완충액이나 RNase가 없는 물에 용해하여 얻을 수 있으며 추출 과정에서 시약에 의해 RNA가 변성되는 것을 방지하여 ..

실험 프로토콜

RNA의 정의 RNA는 DNA (디옥시리보핵산)와 함께 유전정보를 전달하고 생물체 내에서 단백질 합성에 관여하는 분자입니다. RNA는 DNA와는 달리 여러 사본이 생성됩니다. 생성된 사본들은 메신저 RNA (mRNA), 전사 RNA (tRNA), 리보솜 RNA (rRNA) 등으로 분류됩니다. mRNA는 DNA에서 유전정보를 전달받아 단백질 합성에 사용되는 RNA이며, tRNA는 mRNA가 지시하는 아미노산을 가져다가 단백질 합성에 사용됩니다. rRNA는 단백질과 결합하여 리보솜을 형성하여 단백질 합성에 참여합니다. 또한, RNA는 조절적 기능을 담당하기도 합니다. 이러한 다양한 역할로 인해 RNA는 생물체 내에서 중요한 역할을 수행하며, 생명의 다양한 측면에 관여합니다. RNA 추출의 원리 mRNA 추출..